抗體標(biāo)記是指將標(biāo)記物(酶,熒光素,生物素等)共價(jià)連接到抗體上,與待檢測(cè)物(如某些特定抗原)特異性反應(yīng)形成多元復(fù)合物,并借助于熒光顯微鏡、射線測(cè)量?jī)x、酶標(biāo)檢測(cè)儀、電子顯微鏡和發(fā)光免疫測(cè)定儀等精密儀器對(duì)試驗(yàn)結(jié)果直接鏡檢觀察或進(jìn)行自動(dòng)化測(cè)定,可以在細(xì)胞、亞細(xì)胞、超微結(jié)構(gòu)及分子水平上對(duì)抗原、抗體反應(yīng)進(jìn)行定性和定位研究或應(yīng)用各種液相和固相免疫分析方法對(duì)體液中的半抗原、抗原進(jìn)行定性和定量測(cè)定。目前抗體標(biāo)記技術(shù)己被廣泛用于醫(yī)學(xué)病理學(xué)、免疫組織化學(xué)、分子生物學(xué)、生物制藥等領(lǐng)域的分析研究與技術(shù)測(cè)定,常見(jiàn)的抗體標(biāo)記技術(shù)包括酶標(biāo)記法,生物素化標(biāo)記法,熒光素標(biāo)記法和膠體金標(biāo)記法等。
抗體標(biāo)記
FITC標(biāo)記:FITC為熒光基團(tuán),最大吸收光波長(zhǎng)為490~495 nm,最大發(fā)射光波長(zhǎng)為520~530 nm,呈黃綠色熒光。在堿性環(huán)境下,抗體的賴(lài)氨酸R氨基能夠與FITC的硫碳胺鍵共價(jià)結(jié)合,形成抗體-FITC熒光復(fù)合物。結(jié)合熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀等,可對(duì)相應(yīng)抗原進(jìn)行示蹤、定性和定量分析。
HRP標(biāo)記:HRP表面的糖分子被氧化成醛基,與抗體的氨基共價(jià)結(jié)合,形成HRP-抗體復(fù)合物。被HRP標(biāo)記的抗體在特定酶與底物下,顏色發(fā)生變化,通過(guò)對(duì)其顏色的深淺進(jìn)行抗原的定性、定量分析,被廣泛用于WB、ELISA、免疫組化等分析方法中。
生物素標(biāo)記:體外生物素化標(biāo)記,可將抗體的Avi標(biāo)簽或多個(gè)氨基進(jìn)行生物素化。生物素化的抗體可與親和素等特異結(jié)合,可用于抗體的純化,免疫組化,ELISA分析等。
抗體標(biāo)記服務(wù)內(nèi)容[2]
酶(HRP)標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見(jiàn)、敏感性高。
熒光素(FITC)標(biāo)記:熒光色素是zui常用于標(biāo)記抗體的標(biāo)記物。熒光素經(jīng)恰當(dāng)?shù)募ぐl(fā)可發(fā)光,從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平精確定位的方法。
生物素(Biotin)標(biāo)記:生物素標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性,將生物素與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。
服務(wù)流程
1、請(qǐng)聯(lián)系業(yè)務(wù)員,與公司商定具體的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目、數(shù)量和費(fèi)用,雙方簽訂合同
2、客戶(hù)支付服務(wù)款項(xiàng),并提供待標(biāo)記樣品和樣本接收單,我公司按照合同要求安排標(biāo)記服務(wù),并在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成標(biāo)記委托服務(wù)
3、標(biāo)記完成后,返還給客戶(hù),同時(shí)提供電子版標(biāo)記報(bào)告
樣品要求
1、待標(biāo)記樣品最好是干粉,如果是液體,濃度應(yīng)大于0.5 mg/ml
2、含有疊氮鈉的抗體IgG樣品不能標(biāo)記HRP
3、抗體IgG樣品中如果含有BSA、甘氨酸等成分可能影響標(biāo)記效果,請(qǐng)慎重選擇
4、大分子蛋白應(yīng)提供分子量、等電點(diǎn)、緩沖液成分及pH等信息
5、請(qǐng)?zhí)崆罢f(shuō)明其他任何特殊情況。
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