人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述：產(chǎn)品可保人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

產(chǎn)品型號(hào)：GOY-01X1340
廠(chǎng)商性質(zhì)：科研
更新時(shí)間：2023-10-24 00:00:00
訪(fǎng) 問(wèn) 量：326

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人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品名稱(chēng)：人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞

貨號(hào)：GOY-01X1340

分類(lèi)：原代細(xì)胞

2.組織來(lái)源：卵巢組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類(lèi)固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢，但是部分魚(yú)類(lèi)的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu)，而所有鳥(niǎo)類(lèi)只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對(duì)卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周?chē)糠?，主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成；髓質(zhì)位于，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。微血管又稱(chēng)毛細(xì)血管。分布于各種組織和細(xì)胞間的微細(xì)的血管。介于微動(dòng)脈和微靜脈之間。平均直徑7～9微米，數(shù)量極多，成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細(xì)胞及一薄層基膜組成，厚約0.5微米。基膜外面有薄層結(jié)締組織，其中有纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和周細(xì)胞等。細(xì)的微血管由一個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成管腔，較粗的微血管由2～3個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成。分布于肌肉組織、神經(jīng)組織和結(jié)締組織中的微血管，內(nèi)皮細(xì)胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃），稱(chēng)連續(xù)微血管。血管內(nèi)皮細(xì)胞在器官和組織的結(jié)構(gòu)和功能上起著非常重要的作用。并與多種疾病的發(fā)生與發(fā)展有關(guān)。近年來(lái)血管內(nèi)皮細(xì)胞在炎癥、休克等一系列病理生理改變中的重要性愈來(lái)愈受到人們的重視。研究發(fā)現(xiàn)，不同來(lái)源的內(nèi)皮細(xì)胞在生物學(xué)特征、結(jié)構(gòu)和功能等方面均存在一定差別，而同是微血管內(nèi)皮細(xì)胞，它們又存在器官和組織的特異性。

5.方法簡(jiǎn)介：公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等換液頻率每2-3天換液一次生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣傳代特性可傳3代左右培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

培養(yǎng)操作：

人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi)；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓脫落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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