大鼠多巴胺神經(jīng)元細胞

簡要描述：產(chǎn)品可保大鼠多巴胺神經(jīng)元細胞的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠多巴胺神經(jīng)元細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于大鼠多巴胺神經(jīng)元細胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

產(chǎn)品型號：GOY-01X1304
廠商性質(zhì)：科研
更新時間：2023-10-24 00:00:00
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大鼠多巴胺神經(jīng)元細胞

產(chǎn)品名稱：大鼠多巴胺神經(jīng)元細胞

貨號：GOY-01X1304

分類：原代細胞

2.組織來源：腦組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：大鼠多巴胺神經(jīng)元細胞分離腦組織；多巴胺神經(jīng)元，即：胺能神經(jīng)元，主要指含多巴胺的神經(jīng)元，其細胞體主要分布在黑質(zhì)、腳間核和丘腦下部等處。在這些區(qū)域多巴胺含量很高。多巴胺在機體內(nèi)合成時以酪為原料。腦內(nèi)的多巴胺主要是由黑質(zhì)細胞來合成，這些多巴胺參與錐體外系統(tǒng)的活動，與軀體運動機能有密切關(guān)系。腦內(nèi)多巴胺代謝失常時，可引起震顫性麻痹(帕金森震顫)。多巴胺(Dopamine)，是NA的前體物質(zhì)，是下丘腦和腦垂體腺中的一種關(guān)鍵神經(jīng)遞質(zhì)，中樞神經(jīng)系統(tǒng)中多巴胺的濃度受精神因素的影響，神經(jīng)末梢的GnRH和多巴胺間存在著軸突聯(lián)系并相互作用，以及多巴胺有抑制GnRH分泌的作用。中腦的神經(jīng)原物質(zhì)多巴胺(Dopamine)，則直接影響人們的情緒。從理論上來看，增加這種物質(zhì)，就能讓人興奮，但是它會令人上癮。多巴胺在前腦和基底神經(jīng)節(jié)(Basal Ganglia)出現(xiàn)，基底神經(jīng)節(jié)負(fù)責(zé)處理恐懼的情緒，但由于多巴胺的緣故，取代了恐懼的感覺，因此有很多人的上癮行為，都是因多巴胺而起的。

5.方法簡介：公司實驗室分離的大鼠多巴胺神經(jīng)元細胞采用消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：公司實驗室分離的大鼠多巴胺神經(jīng)元細胞經(jīng)TH免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：包被條件 PLL（0.1mg/ml）培養(yǎng)基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等換液頻率每2-3天換液一次生長特性貼壁細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣傳代特性屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

培養(yǎng)操作：

大鼠多巴胺神經(jīng)元細胞1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓脫落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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