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小鼠視乳頭星形膠質細胞

簡要描述：產品可保小鼠視乳頭星形膠質細胞的生長狀態(tài)。本產品中已包含小鼠視乳頭星形膠質細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠視乳頭星形膠質細胞的體外培養(yǎng)。本產品僅供進一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

產品型號：GOY-01X1248
廠商性質：科研
更新時間：2023-10-24 00:00:00
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小鼠視乳頭星形膠質細胞

產品名稱：小鼠視乳頭星形膠質細胞

貨號：GOY-01X1248

分類：原代細胞

2.組織來源：眼球

3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：小鼠視乳頭星形膠質細胞分離自視神經(jīng)乳頭；視乳頭位于黃斑區(qū)鼻側附近，境界清楚，呈白色、圓盤狀，因此也稱為視盤。視網(wǎng)膜上視覺纖維在此匯集，并于此穿出眼球向視中樞傳遞。視乳頭有一小凹陷區(qū)，稱為視杯或生理凹陷。視乳頭是視神經(jīng)纖維聚合組成視神經(jīng)的起始端，它沒有視細胞，因而沒有視覺，在視野中是生理盲點。視乳頭是開角型青光眼早受損的部位，星形膠質細胞是視神經(jīng)乳頭處主要的膠質細胞類型，可為視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞無髓鞘的軸突提供結構和生物支持。青光眼視變是不可逆性致肓眼病。青光眼視變以視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞軸突喪失并伴有視乳頭處細胞外基質重坦為主要特征。導致視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞喪失的病理生理機制尚未闡明，神經(jīng)膠質細胞對調控神經(jīng)元微環(huán)境起多重作用，越來越多的證據(jù)表明膠質細胞町能對神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、損傷、修復及再生起極為關鍵的作用。視乳頭星形膠質細胞胞體多扁平，體積較大，形狀多呈不規(guī)則的多邊形，突起較粗，胞核為橢圓形，核仁清晰可見，核周有較密集物質，胞質稀疏，骨架結構良好，明顯不同于長梭形的成纖維細胞形態(tài)。

5.方法簡介：公司實驗室分離的小鼠視乳頭星形膠質細胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法、結合差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：公司實驗室分離的小鼠視乳頭星形膠質細胞經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等換液頻率每2-3天換液一次生長特性貼壁細胞形態(tài) 梭形、多角形傳代特性可傳3代左右培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

培養(yǎng)操作：

小鼠視乳頭星形膠質細胞1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓脫落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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