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大鼠胸腺淋巴細胞

簡要描述：產品可保大鼠胸腺淋巴細胞的生長狀態(tài)。本產品中已包含大鼠胸腺淋巴細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于大鼠胸腺淋巴細胞的體外培養(yǎng)。本產品僅供進一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

產品型號：GOY-01X1128
廠商性質：科研
更新時間：2023-10-24 00:00:00
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大鼠胸腺淋巴細胞

產品名稱：大鼠胸腺淋巴細胞

貨號：GOY-01X1128

分類：原代細胞

2.組織來源：胸腺組織

3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：大鼠胸腺淋巴細胞分離自胸腺組織；胸腺是機體的重要淋巴器官，其功能與免疫緊密相關，是T細胞分化、發(fā)育、成熟的場所。其還可以分泌胸腺激素及激素類物質，具內分泌機能的器官。位于胸腔前縱隔。胚胎后期及初生時，是一生中重量相對的時期。隨年齡增長，胸腺繼續(xù)發(fā)育；此后胸腺逐漸退化，淋巴細胞減少，脂肪組織增多。胸腺的結構表面有結締組織被膜，結締組織伸入胸腺實質把胸腺分成許多不分隔的小葉。小葉周邊為皮質，深部為髓質。皮質不包圍髓質，相鄰小葉髓質彼此銜接。皮質主要由淋巴細胞和上皮性網狀細胞構成，胞質中有顆粒及泡狀結構。網狀細胞間有密集的淋巴細胞。胸腺的淋巴細胞又稱為胸腺細胞，在皮質淺層細胞較大，為較原始的淋巴細胞。中層為中等大小的淋巴細胞，深層為小淋巴細胞。從淺層到深層為造血干細胞增殖分化為小淋巴細胞的過程。皮質內還有巨噬細胞，無淋巴小結。髓質中淋巴細胞少而稀疏，上皮性網狀細胞多而顯著。形態(tài)多樣，胞質中有顆粒及泡狀結構，為其分泌物，尚有散在的圓形的胸腺小體。

5.方法簡介：公司實驗室分離的大鼠胸腺淋巴細胞采用機械研磨法結合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為1×10?cells/瓶。

6.質量檢測：公司實驗室分離的大鼠胸腺淋巴細胞經過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等換液頻率每2-3天換液一次生長特性懸浮細胞形態(tài) 圓形傳代特性不增殖；不傳代培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

培養(yǎng)操作：

大鼠胸腺淋巴細胞1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓脫落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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