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大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述:產(chǎn)品可保大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

  • 產(chǎn)品型號(hào):GOY-01X1112
  • 廠商性質(zhì):科研
  • 更新時(shí)間:2023-10-24 00:00:00
  • 訪  問(wèn)  量:304

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詳細(xì)介紹


大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞

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產(chǎn)品名稱:大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞

貨號(hào):GOY-01X1112

分類:原代細(xì)胞

2.組織來(lái)源:腦組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞分離自腦組織;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞,是哺乳動(dòng)物腦內(nèi)分布廣泛的一類細(xì)胞,也是膠質(zhì)細(xì)胞中體積的一種。用經(jīng)典的金屬浸鍍技術(shù)(銀染色)顯示此類膠質(zhì)細(xì)胞呈星形,從胞體發(fā)出許多長(zhǎng)而分支的突起,伸展充填在神經(jīng)細(xì)胞的胞體及其突起之間,起支持和分隔神經(jīng)細(xì)胞的作用。細(xì)胞突起的末端常膨大形成腳板或稱終足,有些腳板貼附在鄰近的毛細(xì)血管壁上,因此這些腳板又被稱為血管足或血管周足,靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內(nèi)表面,彼此連接構(gòu)成膠質(zhì)界膜。細(xì)胞剛分離時(shí)呈圓形,24h后大部分細(xì)胞貼壁,均勻分布于瓶底,部分細(xì)胞伸出細(xì)小突起,培養(yǎng)4-5d后細(xì)胞數(shù)量明顯增多,呈扁平、多角形,胞質(zhì)豐富且核漿較少,細(xì)胞核呈橢圓形,偏于胞體一側(cè)。神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的重要細(xì)胞組成,不僅具有支持功能,還能夠合成及分泌多種神經(jīng)活性物質(zhì),在維持神經(jīng)元內(nèi)外環(huán)境、生存、遷移、免疫調(diào)節(jié)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、軸突生長(zhǎng)及功能整合等方面具有重要作用。

5.方法簡(jiǎn)介:公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形 傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài) 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%




培養(yǎng)操作

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大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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