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小鼠肝枯否細胞

簡要描述：產(chǎn)品可保小鼠肝枯否細胞的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠肝枯否細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠肝枯否細胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

產(chǎn)品型號：GOY-01X1099
廠商性質(zhì)：科研
更新時間：2023-10-24 00:00:00
訪問量：308

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小鼠肝枯否細胞

產(chǎn)品名稱：小鼠肝枯否細胞

貨號：GOY-01X1099

分類：原代細胞

2.組織來源：肝臟組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：小鼠枯否細胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里的器官，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接?？莘袷霞毎?span lang="EN-US">(Kupffer細胞)是肝臟的肝血竇內(nèi)一些固定于竇壁的巨噬細胞，它能吞噬和清除大部分從腸道來的抗原微粒，并能吞噬和清除肝血竇中的細菌、異物和衰老的紅細胞，并把血紅蛋白分解成膽紅素。此外，肝巨噬細胞也有處理抗原，誘導T細胞增殖，參與免疫調(diào)節(jié)的作用?？莘袷霞毎鸵话憔奘杉毎煌?，枯否氏細胞不具有增加抗原免疫原性的能力，相反有消除或減弱抗原性的作用。枯否氏細胞能吞噬來自血液循環(huán)的抗原抗體復合物和其他有害物質(zhì)，以消除這些物質(zhì)對機體的損害?？莘窦毎δ苷系K可導致腸源性內(nèi)毒素血癥。電鏡下有很多皺褶和微絨毛。

5.方法簡介：公司實驗室分離的小鼠肝枯否細胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心、差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：公司實驗室分離的小鼠肝枯否細胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等換液頻率每2-3天換液一次生長特性貼壁細胞形態(tài) 梭形、巨噬細胞傳代特性屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群消化液（12mM）培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

培養(yǎng)操作：

小鼠肝枯否細胞1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓脫落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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