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簡要描述：產(chǎn)品可保大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
產(chǎn)品型號(hào)：GOY-01X1083 廠商性質(zhì)：科研更新時(shí)間：2023-10-24 00:00:00訪 問 量：272產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱：大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞
貨號(hào)：GOY-01X1083
分類：原代細(xì)胞
2.組織來源：脊髓組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介：大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞分離自脊椎背根神經(jīng)節(jié)；感覺神經(jīng)母細(xì)胞發(fā)出軸突，呈束狀，左右對(duì)稱地從神經(jīng)管的背部進(jìn)入，此時(shí)的脊神經(jīng)節(jié)即改稱為背根神經(jīng)節(jié)。神經(jīng)系統(tǒng)最基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是神經(jīng)元，即神經(jīng)細(xì)胞，其大小和外觀在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體，內(nèi)含神經(jīng)絲、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和一個(gè)有明顯核仁的核。一些大神經(jīng)元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示，在光鏡下是灰藍(lán)色斑塊狀，稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經(jīng)元的突起，能在神經(jīng)元之間傳遞電沖動(dòng)，突起的大小和形態(tài)各不相同，很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。脊髓背根神經(jīng)節(jié)是周圍神經(jīng)的主要傳入神經(jīng)元，是感覺信號(hào)傳導(dǎo)的中繼站。背根神經(jīng)元細(xì)胞的獲取較為困難，需要在盡可能短的時(shí)間內(nèi)通過解剖顯微鏡獲得一定量的背根神經(jīng)節(jié)組織。神經(jīng)組織體外培養(yǎng)方法是當(dāng)代神經(jīng)科學(xué)一項(xiàng)很有價(jià)值的研究手段，背根神經(jīng)節(jié)富含周圍神經(jīng)系統(tǒng)感覺神經(jīng)元，已廣泛用于軸突的導(dǎo)向及再生、中樞及周圍神經(jīng)系統(tǒng)的髓鞘形成、神經(jīng)營養(yǎng)因子作用及受體分布、神經(jīng)細(xì)胞衰老機(jī)制、基因治療、組織工程等神經(jīng)科學(xué)的研究。
5.方法簡介：公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞采用膠原酶-聯(lián)合消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測：公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息：包被條件 PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣 傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yǎng)操作：
大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
產(chǎn)品咨詢
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