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簡要描述：產(chǎn)品可保人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
產(chǎn)品型號：GOY-01X1073 廠商性質(zhì)：科研更新時間：2023-10-24 00:00:00訪 問 量：301產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱：人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞
貨號：GOY-01X1073
分類：原代細(xì)胞
2.組織來源：腦組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介：人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞分離自腦組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面，即外側(cè)面(約占整個皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積)；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的一種，相當(dāng)于腦和脊髓中的巨噬細(xì)胞，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的道也是主要的一道免疫防線。小膠質(zhì)細(xì)胞大約占大腦中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的20%，小膠質(zhì)細(xì)胞不停地清除著中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的損壞的神經(jīng)，斑塊及感染性物質(zhì)。無數(shù)臨床上和理學(xué)研究表明激活的小膠質(zhì)細(xì)胞在神經(jīng)退化類疾病的發(fā)病機理中起到十分重要的作用，如帕金森病、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等。但是過多激活或失控的小膠質(zhì)細(xì)胞會引起神經(jīng)毒性。它們是促炎因子和氧化應(yīng)激的重要來源，如腫瘤壞死因子(TNF)，一氧化氮，白介素等有神經(jīng)毒性的物質(zhì)。神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞的主要功能：①神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中；②當(dāng)程序性細(xì)胞死亡時，或在大腦發(fā)育的過程中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時，神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細(xì)胞；③膠質(zhì)細(xì)胞能在Ⅱ類組織相容性復(fù)合體表達(dá)CD-4陽性T細(xì)胞時表達(dá)抗原，能進行Fc介導(dǎo)的巨噬作用，并且與造血細(xì)胞和巨噬細(xì)胞組織共享抗原。
5.方法簡介：公司實驗室分離的人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法，在培養(yǎng)基營養(yǎng)缺失數(shù)天后經(jīng)搖床震蕩收集脫落細(xì)胞制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測：公司實驗室分離的人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)CD11b免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形 傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群 消化液 （12mM） 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yǎng)操作：
人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
產(chǎn)品咨詢
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