人尿道上皮細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述：產(chǎn)品可保人尿道上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人尿道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于人尿道上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

產(chǎn)品型號(hào)：GOY-01X0949
廠商性質(zhì)：科研
更新時(shí)間：2023-10-24 00:00:00
訪問(wèn) 量：292

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人尿道上皮細(xì)胞

產(chǎn)品名稱：人尿道上皮細(xì)胞

貨號(hào)：GOY-01X0949

分類：原代細(xì)胞

2.組織來(lái)源：尿道組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：人尿道上皮細(xì)胞分離自尿道管組織；尿道是從膀胱通向體外的管道。尿道上皮細(xì)胞主要功能：①尿道上皮細(xì)胞排列在膀胱表面，它是由高可塑性和具有多種功能特殊類型的細(xì)胞組成；②上皮細(xì)胞組成膀胱的防御系統(tǒng)與病原體接觸，它們具有多種防御機(jī)制來(lái)阻止病原體粘著，保持泌尿器溶解物的不滲透性；③膀胱上皮細(xì)胞表達(dá)雌激素α、β受體，上皮生長(zhǎng)因子受體和纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體，在損傷和感染時(shí)，這些受體對(duì)膀胱上皮細(xì)胞起著重要作用；④能釋放許多細(xì)胞因子、免疫系統(tǒng)介質(zhì)。

5.方法簡(jiǎn)介：公司實(shí)驗(yàn)室分離的人尿道上皮細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：公司實(shí)驗(yàn)室分離的人尿道上皮細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等換液頻率每2-3天換液一次生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣傳代特性可傳2-3代培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

培養(yǎng)操作：

人尿道上皮細(xì)胞1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓脫落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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