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人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述:產(chǎn)品可保人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

  • 產(chǎn)品型號(hào):GOY-01X0856
  • 廠商性質(zhì):科研
  • 更新時(shí)間:2023-10-24 00:00:00
  • 訪  問(wèn)  量:325

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詳細(xì)介紹


人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

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產(chǎn)品名稱(chēng):人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

貨號(hào):GOY-01X0856

分類(lèi):原代細(xì)胞

2.組織來(lái)源:肝動(dòng)脈組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自肝動(dòng)脈組織;在胚胎期,肝臟有3條動(dòng)脈供血,分別來(lái)源于胃左動(dòng)脈、腹腔動(dòng)脈和腸系膜上動(dòng)脈,這3條動(dòng)脈分別的不同部位。出生后,一般保留一條動(dòng)脈,大部分為起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈,由其分出左、右肝動(dòng)脈供應(yīng)左、右半肝。偶爾也可見(jiàn)起源于胃左動(dòng)脈的動(dòng)脈或起源于腸系膜上動(dòng)脈的動(dòng)脈。但也有2條動(dòng)脈并存的情況,如起源于腹腔動(dòng)脈和起源于胃左動(dòng)脈(25%),起源于腹腔動(dòng)脈和起源于腸系臘上動(dòng)脈(10%),而起源于胃左動(dòng)脈和起源于腸系膜上動(dòng)脈的2條動(dòng)脈同時(shí)存在的情況比較少見(jiàn)。此外,還有5%像胚胎期一樣,3條動(dòng)脈同時(shí)存在。這種起源于腹腔動(dòng)脈以外的肝動(dòng)脈稱(chēng)為迷走肝動(dòng)脈,如果肝臟沒(méi)有起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈供血時(shí),此種異位起源的肝動(dòng)脈稱(chēng)替代動(dòng)脈,如果在常見(jiàn)肝動(dòng)脈類(lèi)型外,還有一支這種異位起始的動(dòng)脈的一部分血流,這種肝動(dòng)脈稱(chēng)副肝動(dòng)脈。肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是襯于肝動(dòng)脈內(nèi)表面的單層扁平上皮,在炎癥時(shí)高表達(dá)黏附分子,與血流中白細(xì)胞表面黏附分子相互作用,從而介導(dǎo)白細(xì)胞穿越血管壁,亦屬一類(lèi)非專(zhuān)職抗原提呈細(xì)胞。它們吞噬異物、細(xì)菌、壞死和衰老的組織,還參與集體免疫活動(dòng),包括:①血管收縮及血管舒張,從而控制血壓;②凝血(血栓形成及纖維蛋白溶解);③動(dòng)脈硬化;④血管生成;⑤炎癥及腫脹(浮腫);⑥內(nèi)皮細(xì)胞亦控制一些物質(zhì),如白血球進(jìn)出血管。

5.方法簡(jiǎn)介:公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%) 培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性 可傳2-3代 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%




培養(yǎng)操作

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人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi);
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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