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小鼠胰島細胞

簡要描述:產品可保小鼠胰島細胞的生長狀態(tài)。本產品中已包含小鼠胰島細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠胰島細胞的體外培養(yǎng)。本產品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

  • 產品型號:GOY-01X0746
  • 廠商性質:科研
  • 更新時間:2023-10-24 00:00:00
  • 訪  問  量:329

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小鼠胰島細胞

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產品名稱:小鼠胰島細胞

貨號:GOY-01X0746

規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

分類:原代細胞

2.組織來源:胰腺組織

3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:小鼠胰島細胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰島細胞作為糖尿病新藥的細胞篩選模型需保持其結構完整、生理功能穩(wěn)定和足夠長的存活時間。胰島占胰腺總質量的1%-2%,每個胰島大概含有1000個細胞。胰島移植可消除常規(guī)治療產生的嚴重低血糖癥狀,具有創(chuàng)傷小及并發(fā)癥少等優(yōu)點,是有前景的Ⅰ型糖尿病治療方案。移植胰島的獲得需經過供體篩選、胰腺消化、胰島分離純化及結果鑒定等步驟,分離純化效果取決于原料及操作方法的選擇。

5.方法簡介:公司實驗室分離的小鼠胰島細胞采用膠原酶灌注消化法結合密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:公司實驗室分離的小鼠胰島細胞經DTZ染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 梭形、多角形 傳代特性 可傳1-2代 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%




培養(yǎng)操作

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小鼠胰島細胞1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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