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人肺大靜脈平滑肌細胞

簡要描述:產(chǎn)品可保人肺大靜脈平滑肌細胞的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人肺大靜脈平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人肺大靜脈平滑肌細胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

  • 產(chǎn)品型號:GOY-01X0697
  • 廠商性質(zhì):科研
  • 更新時間:2023-10-24 00:00:00
  • 訪  問  量:355

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詳細介紹


人肺大靜脈平滑肌細胞

55.jpg

產(chǎn)品名稱:人肺大靜脈平滑肌細胞

貨號:GOY-01X0697

規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

分類:原代細胞

2.組織來源:肺靜脈組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:人肺大靜脈平滑肌細胞分離自肺大靜脈組織;肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中,把動脈血由肺送回心臟的靜脈,是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對,共4條,兩條連接右肺,兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接,而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓,是由于肺靜脈內(nèi)血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下,肺循環(huán)具有血壓低、阻力小和順應性大的特點,肺動脈壓力高低取決于單位時間內(nèi)肺動脈血流量和肺血管的阻力,要維持肺循環(huán)的低壓、低阻的狀態(tài),必須保證整個肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻,血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細血管進入肺靜脈,再入左心室,經(jīng)過左心室收縮進入體循環(huán),才能避免肺動脈內(nèi)壓力升高。肺大靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。該細胞參與血管壁炎癥反應,保持靜脈管腔的通暢,還是多數(shù)動脈疾病的靶細胞。

5.方法簡介:公司實驗室分離的人肺大靜脈平滑肌細胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:公司實驗室分離的人肺大靜脈平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 成纖維細胞樣 傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%


培養(yǎng)操作

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人肺大靜脈平滑肌細胞1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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