國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒克隆化的方法軟瓊脂平板法分析

．國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒配2.5%的瓊脂糖30ml，水浴溶化后，移入45℃水浴中。

2．將7ml*DMEM液和3ml0倍濃度的DMEM液混合，置45℃水浴預(yù)熱。

3．將瓊脂糖與DMEM液混合，即為含0.5%瓊脂糖的*DMEM液，并加75×08脾細(xì)胞。

4．每塊平皿加0ml，于室溫中凝固。

5．DMEM中的細(xì)胞與DMEM—瓊脂:混合，將細(xì)胞瓊脂混合物2ml鋪于凝固的平板上，使其全部覆蓋。

6．放入CO2箱飽和濕度，37℃培養(yǎng)0天。

7．用PBS配制0.6%瓊脂糖，于沸水浴溶解后，置45℃，在保溫情況下取一試管，國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒迅速加入0.ml25%羊紅血球，0.2ml豚鼠補(bǔ)體，2.7ml0.6%瓊脂糖。

8．用3ml瓊脂糖—羊紅血球混合液覆蓋克隆。于37℃CO2箱孵育h~2h。從克隆上部溶解羊紅血球的溶血范圍，可篩選抗羊紅血球Ig。