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簡要描述：LS 174T [LS174T] (人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)生長培養(yǎng)基 MEM（ATCC改良)＋10% FBS＋1% P/S 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
產(chǎn)品型號：GOY-01X0144 廠商性質(zhì)：科研更新時間：2023-10-24 00:00:00訪 問 量：541產(chǎn)品分類
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公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗，不做其他科學(xué)實驗外的使用！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
LS 174T [LS174T] (人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) | 1×10?/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0144 |
商品詳情：
名稱；LS 174T [LS174T] (結(jié)腸腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱 Ls174T; LS174t; Ls-174-T;
LS-174-T; LS 174 T; LS-174T; Ls-174T; LS 174T; LS-174; LS174
種屬 人類
年齡（性別） 女性，58歲
組織來源 直腸；結(jié)直腸腺癌
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
背景描述 LS 174T細(xì)胞是LS 180細(xì)胞的化變種。LS 174T細(xì)胞比親本更易傳代，像LS 180細(xì)胞一樣生成大量的癌胚抗原(CEA)。電鏡研究表明，LS 174T細(xì)胞有豐富的微絲和細(xì)胞質(zhì)粘液素液泡。LS 174T細(xì)胞直腸抗原3陽性；p53抗原表達陰性，但mRNA表達陽性。LS 174T細(xì)胞角蛋白染色陽性；LS 174T細(xì)胞癌基因c-myc、N-myc、H-ras、N-ras、Myb和fos的表達呈陽性；癌基因k-ras和sis的表達未做檢測。
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 MEM（ATCC改良)＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~30-40小時
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
致瘤性 Yes, in nude mice (Tumors
developed within 21 days at frequency
(5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7
cells).
抗原表達情況 serologically defined colon cancer antigen 3; Homo sapiens, expressed HLA A2, B13, B50; Blood Type O
基因表達情況 carcinoembryonic antigen (CEA), interleukin 10 (IL-10), interleukin 6 (IL-6), mucin The production of CEA in the ATCC seed stock was 1944 ng per 10^6 cells in 10 days.
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一、LS 174T [LS174T] (人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、 對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
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