簡要描述:棒桿菌通用PCR檢測試劑盒廠家是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:棒桿菌通用PCR檢測試劑盒廠家
英文名稱:Corynebacterium spp.PCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運(yùn)輸:低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途:生化實(shí)驗(yàn),合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
性能指標(biāo):點(diǎn)擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.棒桿菌通用PCR檢測試劑盒廠家試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個月
使用方法:
一、棒桿菌通用PCR檢測試劑盒廠家樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
棒桿菌通用PCR檢測試劑盒廠家參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。?苯甲酸芐酯標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Benzyl Benzoate CAS:20-5-4
苯甲醇標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Benzyl Alcohol CAS:00-5-6
甲磺酰苯扎托品標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Benztropine Mesylate CAS:32-7-2
苯佐那酯標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Benzonatate CAS:04-3-4
苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Benzoic Acid CAS:65-85-0
標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Benzocaine CAS:34584
芐索氯銨標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Benzethonium Chloride CAS:2-54-0
苯標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Benzaldehyde (List Chemical) CAS:00-52-7
標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Benoxinate Hydrochloride CAS:5987-82-6
芐氟噻標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Bendroflumethiazide CAS:73-48-3
標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Benazepril Hydrochloride CAS:8654-74-4
雙-乙基乙氧甲氧苯基三相關(guān)物質(zhì)混合物標(biāo)準(zhǔn)品
英文名稱:Bemotrizinol Impurity Mixture CAS:8654-74-4
雙-乙基乙氧甲氧苯基三標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Bemotrizinol CAS:87393-00-6
山崳酰氧基聚氧甘油酯標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Behenoyl Polyoxylglycerides CAS:
標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Beclomethasone Dipropionate CAS:327543
棒桿菌通用PCR檢測試劑盒廠家 載玻片細(xì)胞INSULIN R-ALPHA 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0/20次
冰凍切片組織INSULIN R-ALPHA 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0/20次
石蠟切片組織INSULIN R-ALPHA 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0/20次
細(xì)胞INSULIN R-ALPHA 蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0/50 次
細(xì)胞INSULIN R-ALPHA 蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0/50 次
INSULIN R-ALPHA 蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次
INSULIN R-ALPHA 蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次
INSULIN R-ALPHA 蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:25次
細(xì)胞FSH-BETA蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0/20次
載玻片細(xì)胞FSH-BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0/20次
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