線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶測試盒可見分光光度法
25 管/12 樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義
線粒體復(fù)合體Ⅴ又稱F1F0-ATP合酶,廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中,
由F1和F0兩個亞單位組成。該酶利用呼吸鏈產(chǎn)生的質(zhì)子電化學(xué)梯度催化ATP合成,也可逆過
程水解ATP。此外,復(fù)合體Ⅴ還存在于葉綠體、異養(yǎng)菌和光合細(xì)菌中。復(fù)合體Ⅴ是線粒體氧
化磷酸化和葉綠體光合磷酸化合成ATP的關(guān)鍵酶。
測定原理
復(fù)合體Ⅴ水解 ATP 產(chǎn)生 ADP 和 Pi,通過測定 Pi 增加速率來測定復(fù)合體Ⅴ活性。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸
餾水。
試劑的組成和配制
試劑一:25mL×1 瓶,-20℃保存;
試劑二:25mL×1 瓶,-20℃保存;
試劑三:1 mL×1 瓶,-20℃保存;
試劑四:粉劑×1 支,-20℃保存;臨用前每支加入 1.3mL 蒸餾水,充分溶解備用,用不完的
試劑仍-20℃保存;
試劑五:6mL×1 瓶,4℃保存;
試劑六:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 3mL 蒸餾水,充分混勻;溶解后 4℃保存一周;
試劑七:粉劑×1 瓶, 4℃保存;臨用前加入 10mL 蒸餾水,充分混勻;溶解后 4℃保存一周;
試劑八:粉劑×1 瓶, 4℃保存;臨用前加入 10mL 蒸餾水,充分混勻;溶解后 4℃保存一周;
試劑九:液體 10mL×1 瓶,室溫保存
