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PC-12 (低分化) (大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化))

簡要描述:PC-12 (低分化) (大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化))注意事項1、Undifferentiated、Lowdifferentiation和Highdifferentiation的區(qū)別:Undifferentiated的PC-12從形態(tài)上看是圓形的,聚團生長的漂浮細胞;Lowdifferentiation的成多角形,有較短的突起;Highdifferentiation的細胞有多個突起,突起數(shù)目不等,突觸較長,類似神經(jīng)元軸突。2、Lowdifferentiation和Highdifferentiation是在Undifferentiated的PC-12基礎(chǔ)上誘導(dǎo)???

  • 產(chǎn)品型號:GOY-01X0476 
  • 廠商性質(zhì):科研
  • 更新時間:2023-10-24 00:00:00
  • 訪  問  量:195

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產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

PC-12 (低分化) (大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化))

1×10?/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0476

商品詳情:

名稱;PC-12(Low differentiation) (大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)) (種屬鑒定正確)

種屬 大鼠

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 多角形

生長培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S

凍存條件 

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件 

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

注意事項 1、Undifferentiated、Low differentiation和High differentiation的區(qū)別:Undifferentiated的PC-12從形態(tài)上看是圓形的,聚團生長的漂浮細胞;Low differentiation的成多角形,有較短的突起;High differentiation的細胞有多個突起,突起數(shù)目不等,突觸較長,類似神經(jīng)元軸突。2、Low differentiation和High differentiation是在Undifferentiated的PC-12基礎(chǔ)上誘導(dǎo)產(chǎn)生的,Low differentiation和High differentiation指的與神經(jīng)細胞表型的相似程度,High differentiation更接近神經(jīng)細胞表型。

背景描述 PC-12(Low differentiation)細胞是來自能移植的雄性大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤。PC-12(Low differentiation)細胞表達神經(jīng)生長因子(NGF)受體,NGF可誘導(dǎo)產(chǎn)生神經(jīng)表型。PC-12(Low differentiation)細胞不合成腎上腺素。

年齡(性別) 雄

組織來源 腎上腺嗜鉻細胞瘤

細胞類型 腫瘤細胞

腫瘤類型 嗜鉻細胞瘤細胞

7.png
細胞培養(yǎng)步驟:

一、PC-12 (低分化) (大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化))復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

a)、 對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴格無菌操作;將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。

三、細胞凍存:

1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;

2、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;

3、用適量的凍存液重懸細胞,并放置于凍存管中;

4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃

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