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簡(jiǎn)要描述：Caco-2 (人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)注意事項(xiàng) 1. 細(xì)胞貼壁慢特別是剛復(fù)蘇時(shí)，一般兩到三天貼壁展開(kāi)，會(huì)有空泡； 2. 細(xì)胞在傳代細(xì)胞中注意消散，不然難貼壁； 3. 成團(tuán)生長(zhǎng)，細(xì)胞密度越大，表面空泡黑點(diǎn)越多； 4. 一般細(xì)胞長(zhǎng)至80%傳代，細(xì)胞成片，其實(shí)密度很大； 5. 細(xì)胞生長(zhǎng)太滿對(duì)細(xì)胞狀態(tài)影響嚴(yán)重，傳代后易碎，死亡； 6. 細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)間越久，消化難度也會(huì)隨之增加；消化到輕拍培養(yǎng)瓶側(cè)邊細(xì)胞可以滑落的時(shí)候可以終止。
產(chǎn)品型號(hào)：GOY-01X0050 廠商性質(zhì)：科研更新時(shí)間：2023-10-24 00:00:00訪 問(wèn) 量：205產(chǎn)品分類(lèi)
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公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)，不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用！
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
Caco-2 (人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) | 1×10?/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0050 |
商品詳情：
名稱(chēng)；Caco-2 (結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱(chēng) CaCo-2; CACO-2; Caco 2; CACO 2;
CACO2; CaCo2; CaCO2; Caco2; Caco-2/ATCC
種屬 人類(lèi)
年齡（性別） 男性，72歲
組織來(lái)源 結(jié)腸，結(jié)直腸腺癌
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
背景描述 Caco-2細(xì)胞分離自直腸原位癌；當(dāng)長(zhǎng)到滿時(shí)，Caco-2細(xì)胞表現(xiàn)出特征性的腸上皮細(xì)胞分化。Caco-2細(xì)胞表達(dá)維甲酸結(jié)合蛋白I和維甲酸結(jié)合蛋白Ⅱ，并呈角質(zhì)蛋白陽(yáng)性。
生物安全等級(jí) 1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 MEM＋20%
FBS＋1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~60-80小時(shí)
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
致瘤性 Yes, in nude mice; forms
moderately well differentiated adenocarcinoma consistent with colonic primary
(grade II).
受體表達(dá)情況 This cell line expressed
heat stable enterotoxin (Sta, E. coli) and epidermal growth factor (EGF).
基因表達(dá)情況 keratin, retinoic acid binding protein 1, retinol binding protein 2
注意事項(xiàng) 1. 細(xì)胞貼壁慢特別是剛復(fù)蘇時(shí)，一般兩到三天貼壁展開(kāi)，會(huì)有空泡； 2. 細(xì)胞在傳代細(xì)胞中注意消散，不然難貼壁； 3. 成團(tuán)生長(zhǎng)，細(xì)胞密度越大，表面空泡黑點(diǎn)越多； 4. 一般細(xì)胞長(zhǎng)至80%傳代，細(xì)胞成片，其實(shí)密度很大； 5. 細(xì)胞生長(zhǎng)太滿對(duì)細(xì)胞狀態(tài)影響嚴(yán)重，傳代后易碎，死亡； 6. 細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)間越久，消化難度也會(huì)隨之增加；消化到輕拍培養(yǎng)瓶側(cè)邊細(xì)胞可以滑落的時(shí)候可以終止。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一、Caco-2 (人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、 對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
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