核糖核酸酶P(RNASEP)活性蛋白(Human，人)

簡要描述：核糖核酸酶P(RNASEP)活性蛋白(Human，人)緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

產(chǎn)品咨詢聯(lián)系我們

產(chǎn)品分類

Product Category

查看全部

詳細介紹

產(chǎn)品名稱：核糖核酸酶P(RNASEP)活性蛋白(Human，人)

物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Active Ribonuclease P (RNASEP)

Rnase-P; RNASEP1; RPP40; Ribonuclease P/MRP 40kDa Subunit

型號：GOY-01D3157

物種	Homo sapiens (Human，人)
來源	活性蛋白
宿主	E.coli
亞細胞定位
預測分子量
實際分子量
片段與標簽
緩沖液成份	20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性狀	凍干粉
純度	> 90%
內(nèi)毒素水平
等電點	6.2
應用	Cellculture;ActivityAssays.
規(guī)格	10μg50μg200μg1mg5mg

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1．核糖核酸酶P(RNASEP)活性蛋白(Human，人)在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3．取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4．取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5．分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1．貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2．懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3．在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4．細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）

7．分裝保存于-70℃,避免反復凍融

產(chǎn)品咨詢

免费中文熟妇在线影片密芽,麻花豆传媒,啦啦啦www日本高清免费观看,久久不见久久见免费影院www日本,妺妺窝人体色777777