倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒

簡(jiǎn)要描述：售后:我公司具有優(yōu)質(zhì)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒一旦售出,產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)過(guò)程中遇到困難可提供在線技術(shù)咨詢。使您使用產(chǎn)品時(shí)沒(méi)有任何的后顧之憂。

產(chǎn)品型號(hào)：GOY-2903E
廠商性質(zhì)：
更新時(shí)間：2023-10-24 00:00:00
訪問(wèn) 量：492

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產(chǎn)品名稱	英文名稱	規(guī)格	貨號(hào)
倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒	Hamster receptor activator of nuclear factor kappa B ligand, RANKL Elisa Kit	48T/96T	GOY-2903E

實(shí)驗(yàn)原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)水平。用純化的倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)，再與HRP標(biāo)記的倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)濃度。

試劑盒組成

1	30倍濃縮洗滌液	20ml×1瓶	7	終止液	6ml×1瓶
2	酶標(biāo)試劑	6ml×1瓶	8	標(biāo)準(zhǔn)品（80pg/ml）	0.5ml×1瓶
3	酶標(biāo)包被板	12孔×8條	9	標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液	1.5ml×1瓶
4	樣品稀釋液	6ml×1瓶	10	說(shuō)明書(shū)	1份
5	顯色劑A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2張
6	顯色劑B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1個(gè)

試劑配制：

1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。

2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4、標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6、標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

操作步驟

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

40pg/ml	5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
20pg/ml	4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10pg/ml	3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
5pg/ml	2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.5pg/ml	1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.

10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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