樣本要求：

　　1.適用標(biāo)本類型：發(fā)病動物血液、空腸及小腸腸內(nèi)容物及組織臟器(腸道組織、腸系膜及淋巴結(jié)等)和病毒培養(yǎng)液。

　　2.標(biāo)本采集，方法如下：

　　(1)血清：用一次性注射器取靜脈血2-3ml，轉(zhuǎn)至5ml的干燥管中，密閉送檢。

　　(2)腸內(nèi)容物：無菌條件下取腸道內(nèi)容物約1g左右，置入1ml含有1.0mlPBS(或生理鹽水)的5ml離心管中，立即送檢。

　　(3)組織臟器：取發(fā)病動物腸道組織及腸系膜淋巴結(jié)等組織約1g，置一1.5ml的潔凈離心管中，密閉送檢。

　　3.應(yīng)避免標(biāo)本間交叉污染。

　　4.標(biāo)本收集后可立即檢測；若不能立即檢測，可置于2～8℃冷藏保存；如需長期保存，標(biāo)本應(yīng)凍存于-80℃以下，避免反復(fù)凍融。

　　實時熒光PCR試劑盒注意事項：

　　1、整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

　　2、為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

　　3、每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。

　　4、試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。

　　5、試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。