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LISA試劑盒檢測不成功的原因

發(fā)布時間:2022-11-15      點擊次數(shù):518

ELISA試劑盒即酶聯(lián)免疫吸附試驗,是一種常用的固相酶免疫測定方法。 由于ELISA方法靈敏,特異性強不需要特殊設(shè)備,所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在臨床檢驗中除正常反應(yīng)外,有時常可見到一些錯誤結(jié)果(即假陽性或假陰性)如標(biāo)本的影響上海勁馬為大家解讀ELISA檢測的影響因素。
  ELISA試劑盒標(biāo)本的影響
    溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性??赡苁侨苎逯泻羞^氧化酶物質(zhì)(紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),在洗滌過程中往往難以*洗脫,它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧(O),從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì),即顯藍(lán)色,產(chǎn)生假陽性[2]。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。
  ELISA試劑盒 標(biāo)本受細(xì)菌污染。因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。
   ELISA試劑盒標(biāo)本保存不當(dāng)。在冰箱中保存過久的標(biāo)本,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、造成假陽性;為克服上述干擾,ELISA試劑盒測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5 d內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時應(yīng)輕柔,不可強烈振蕩。

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