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人白介素6ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
發(fā)布時(shí)間:2022-11-15      點(diǎn)擊次數(shù):502

人白介素6ELISA試劑盒試劑盒組成
30 倍濃縮洗滌液20ml× 瓶7 終止液6ml× 瓶
2 酶標(biāo)試劑6ml× 瓶8 標(biāo)準(zhǔn)品(6ng/L) 0.5ml× 瓶
3 酶標(biāo)包被板2 孔×8 條9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液.5ml× 瓶
4 樣品稀釋液6ml× 瓶0 說(shuō)明書(shū) 份
5 顯色劑A 液6ml× 瓶 封板膜2 張
6 顯色劑B 液6ml×/瓶2 密封袋 個(gè)
標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
人白介素6ELISA試劑盒操作步驟
. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
8 ng/L 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
4 ng/L 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50μl 的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2 ng/L 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50μl 的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
ng/L 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50μl 的3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0.5 ng/L 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50μl 的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水20 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5 分鐘.
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 人白介素6ELISA試劑盒測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后5 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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