植物細(xì)胞分裂素elisa試劑盒技術(shù)分析
操作步驟
從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
待測樣本孔先加待測樣本0μL,再加樣本稀釋液40μL;
隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體50μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育5min。
所有孔加入終止液50μL,5min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
試劑盒性能
. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于.0 ng/ml。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于5%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個月
7. 檢測范圍:9.3ng/ml-300ng/ml
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