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蜜蜂球囊菌PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)方法步驟

發(fā)布時間:2022-11-15      點(diǎn)擊次數(shù):542

今天,我司技能專員為您解析蜜蜂球囊菌PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)方法步驟

方法
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
0×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物(0pM)                 
2 μl     引物2(0pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
μl     DNA模板(50ng-μg/μl) 
μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用00μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-0μl電泳檢測。
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