【目的】快速檢測產(chǎn)赭曲霉毒素 A (OTA)的黑曲霉。
【方法】ELISA試劑盒價格根據(jù)黑曲霉(Aspergillus niger) CBS53.88 中 An5g07920 基因編碼聚酮合酶的?;D(zhuǎn)移酶(AT)域設(shè)計引物,建立針對產(chǎn) OTA 黑曲霉的聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)檢測方法。
【結(jié)果】對 72 株曲霉屬菌株(黑曲霉、炭黑曲霉、赭曲霉、佩特曲霉、寄生曲霉和塔賓曲霉)進行檢測,發(fā)現(xiàn)產(chǎn) OTA 的黑曲霉能夠擴增出特異性條帶,而產(chǎn) OTA 的其它菌株不能擴增出條帶;檢測出 3 株假陽性的產(chǎn) OTA 黑曲霉,實時定量 PCR 分析此 3 株菌中 An5g07920 的同源基因表達情況,ELISA試劑盒價格發(fā)現(xiàn)在產(chǎn)毒條件下可正常表達,排除了因基因無法表達導(dǎo)致假陽性的可能。
本方法的檢測靈敏度為 25 pg 的 DNA 含量,在污染所試農(nóng)產(chǎn)品孢子濃度大于 4.0×04 –4.0×05 個/g 時可有效檢測出產(chǎn)毒菌株。
【結(jié)論】本方法雖會產(chǎn)生 4% 的假陽性結(jié)果,但是仍可作為產(chǎn)毒黑曲霉有效的快速檢測方法,ELISA試劑盒價格并在農(nóng)產(chǎn)品污染產(chǎn)毒黑曲霉時進行有效預(yù)警。
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