HA 的產(chǎn)生機制至今還不能闡明，目前所使用的免 疫試劑抗體大多源于實驗動物，因此，體內(nèi)含HA 的患者在做血清免疫檢測時，HA 可與試劑抗體結(jié)合而導(dǎo)致干擾。HA 通常與試劑抗體的Fc 區(qū)表位或者F(ab’)2 區(qū)域的決定簇結(jié)合。目前公認(rèn)的HA 在免疫測定中的干擾機制主要發(fā)生在夾心免疫測定法和競爭免疫測定法中。  

HA在夾心免疫測定法中的干擾機制

    ELISA夾心法測定中，HA與試劑抗體（捕獲抗體和標(biāo)記抗體）的結(jié)合，可通過Fc-Fc 和Fab-Fab兩種結(jié)合方式干擾測定。正常情況下，在ELISA 夾心法中，待測抗原同時與捕獲抗體和標(biāo)記抗體結(jié)合，形成了固相捕獲抗體-待測抗原-標(biāo)記抗體的復(fù)合物。在以Fc-Fc 的方式結(jié)合的機制中，HA的Fc 端結(jié)合到捕獲抗體的Fc 段上，而HA的Fab 區(qū)域則結(jié)合到標(biāo)記抗體的Fab 區(qū)域上，導(dǎo)致假陽性結(jié)果。在以Fab-Fab 結(jié)合方式的機制可引起假陽性或假陰性的結(jié)果，如HA的Fab區(qū)域通過分別結(jié)合捕獲抗體的Fab區(qū)域和標(biāo)記抗體的Fab 區(qū)域，阻擋捕獲抗體和標(biāo)記抗體與待測抗原的結(jié)合，從而導(dǎo)致假陰性；HA的F(ab’)2 通過同時結(jié)合捕獲抗體的Fab區(qū)域和標(biāo)記抗體的Fab區(qū)域，形成固相捕獲抗體-HA-標(biāo)記抗體復(fù)合物，如果標(biāo)本中無待測抗原，HA就引起假陽性的結(jié)果。

HA在競爭免疫測定法中的干擾機制

    在免疫競爭法測定中，HA干擾也可造成假陽性或假陰性。在正常的競爭性免疫反應(yīng)中，待測抗原與標(biāo)記抗原競爭的結(jié)合到連接在載體上的捕獲抗體，形成正常的反應(yīng)復(fù)合物。但是如果反應(yīng)體系中存在HA，測定結(jié)果將可能出現(xiàn)假陽性或假陰性的現(xiàn)象。造成假陰性結(jié)果的機制：HA通過同時結(jié)合捕獲抗體和標(biāo)記抗原，形成異常的反應(yīng)復(fù)合物，干擾捕獲抗體結(jié)合檢測抗原，消耗可結(jié)合待測抗原的捕獲抗體，從而導(dǎo)致假陰性。造成假陽性結(jié)果的機制：HA直接結(jié)合捕獲抗體與抗原結(jié)合的部位，形成異常的復(fù)合物，占據(jù)捕獲抗體結(jié)合待測抗原或標(biāo)記抗原的結(jié)合空間，消耗可結(jié)合待測抗原或標(biāo)記抗原的捕獲抗體，導(dǎo)致假陽性。

3-位點免疫檢測法中的干擾機制

    該干擾存在于肌鈣蛋白I的免疫檢測中。所謂的3-位點是試劑盒中含有針對肌鈣蛋白I分子上3個不同抗原決定簇的3種抗體，肌鈣蛋白I可以同時結(jié)合2個捕獲抗體與個示蹤抗體或者個捕獲抗體與2個示蹤抗體，使特異性和靈敏度大大提高，后者可使反應(yīng)的靈敏度進(jìn)一步增高。由于肌鈣蛋白I 3-位點免疫測定增加了一種捕獲抗體或者標(biāo)記抗體，這也同時提高了捕獲抗體或者標(biāo)記抗體與HA結(jié)合的機率，從而導(dǎo)致肌鈣蛋白I 3-位點免疫測定比肌鈣蛋白I 雙位點免疫測定更加容易受到HA的干擾，結(jié)合的部位與上述兩種機制相似。