鹿胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA免費代測試劑盒ELISA結(jié)果的鑒定
一,準(zhǔn)確性:免疫學(xué)專一性的測定。用免疫擴散、交叉電泳和免疫電泳測定抗原和抗體的純度。如果是測定抗原(或半抗原),一般將放射免疫測定法(RIA)的結(jié)果作比較;如果是測定抗體,一般將免疫熒光法(IFA)的結(jié)果比較。用其他實驗所得的數(shù)據(jù)來核證。例如病毒侵染動、植物機體后,會出現(xiàn)一系列病理變化,這些病理數(shù)據(jù)與病毒侵染量如存在線性關(guān)系,那么用ELISA測定病毒的量應(yīng)與病理數(shù)據(jù)的變化相一致。多次實驗,將每次ELISA結(jié)果進(jìn)行比較?! ?/p>
二,精確度:將同一樣品進(jìn)行一系列不同濃度的測定,得到濃度范圍廣泛的一條曲線,選擇該曲線坡度陡、重復(fù)性好的區(qū)域作為測定范圍。對ELISA測定范圍的確定,有益于選擇實際使用的合適濃度。
三,靈敏性:ELISA的靈敏性高,它對許多抗原的測定,靈敏度可達(dá)1-10ng/ml。作出ELISA某種方法靈敏度高低的結(jié)論要慎重,因為許多因素會影響ELISA的靈敏度,例如抗體的效價、酶的活性、酶標(biāo)記抗體的質(zhì)量、反應(yīng)的時間與溫度、載體的吸附力、底物的濃度與pH等。只有在條件嚴(yán)格一致的情況下才能作出比較。
計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
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